Összefoglalás:
Az otosclerosis az emberi oticus capsula elsődleges csontátépülési zavara, melynek létrejöttében szerepet játszhat az oticus capsulát érintő perzisztáló ka- nyaróvírus fertőzés. A kanyaróvírus emberi sejtreceptora a membrán kofaktor fehérje (MCFj CD46), amely 14 ismert „splicing” variánssal rendelkezik. Az oticus capsula és a stapes talp egyedi CD46 kifejeződési mintázata meghatározhatja a perzisztáló kanyaróvírus fertőzés, illetve repliká- ció iránti fogékonyságot. Ötvenegy stapedectomia során eltávolított stapes talpat vizsgáltunk kórszövettani- és molekuláris biológiai módszerekkel párhuzamosan. A nukle- insavakat (mRNS, DNS, vRNS) kivontuk a stapes talpakból. A kanyaróvírust nukleoprotein RNS specifikus RT- PCR-ral azonosítottuk. Az alternatív „splicing” során keletkező CD46 izoformákat RT-PCR segítségével sokszorosítottuk. A komplementer DNS (cDNS) amplimereket SDS polyacryl-amid gélelektroforézissel választottuk külön, majd a gélekből sorozatos tisztítással kivontuk. A tisztított cDNS mintákat CD46 specifikus hasítási helyekkel rendelkező restrikciós endonukleázokkal többszörösen hasítottuk. A kanyaróvírus eredetű RNS-t csak a szövettanilag megerősített otosclerosisos stapes talpakban mutattuk ki; a kanyaróvírust nem tartalmazó stapes talpak szövettanilag nem-otosclerosisos stapes ankylosisnak bizonyultak. A szövettani vizsgálat eredményétől függetlenül, minden mintát (N = 51) öt CD46 variáns együttes expressziója jellemzett (c, d, e, f, és egy rövidebb ismeretlen izoforma). A szövettanilag otosclerosisosnak véleményezett mintákat (N = 21) az/variáns és az ismeretlen rövid variáns kifejezetten emelkedett expressziója jellemezte. A fenti két CD46 izoforma fokozott kifejeződése és az oticus capsula egyedi CD46 expressziós mintázata megváltozott, illetve kóros intracelluláris jelátvitelt eredményezhet a kanyaróvírus receptorok szintjén. Ezek a változások a következményes immunológiai eltérésekkel együtt, magyarázhatják a perzisztáló kanyaróvírus fertőzés oticus capsulán belüli kialakulását.
SUMMARY:
Otosclerosis is a primary bone remodeling disorder of the human otic capsule and is associated with persistent measles virus infection. The human cellular receptor of measles virus is the membrane cofactor protein (MCR CD46), which has fourteen well-described splicing variants. Unique CD46 expression pattern of the otic capsule and the stapes footplate may determine the susceptibility for persistent measles virus infection. Fifty-one surgically removed ankylotic stapes footplates were analyzed by histopathological and molecular biological methods, respectively. Nucleic acids were extracted. Measles virus sequences were detected by nucleoprotein RNA-specific RT-PCR. Alternatively spliced RNA of CD46 isoforms were amplified by RT-PCR; cDNA amplimers were separated by SDS poly-acrylamide gel electrophoresis and were purified from the gel. Complementary DNA of CD46 isoforms was restricted by endonuclease enzymes having CD46-specific recognition sites. The presence of viral RNA was obligatory associated with the histopathological diagnosis of otosclerosis; measles virus negative stapes specimens belonged to non-otosclerotic stapes fixations. All specimens (N = 51) were featured by the consequent expression of five CD46 variants (c, d, e, f and one shorter unidentified isoform). Histologically confirmed ostosclerotic specimens (N = 21) were characterized by increased expression levels of variant/and the unknown isoform. Increased expression levels of these isoforms and special CD46 expression pattern of the human otic capsule might produce modified or pathological intracellular signalization that could create the possibility of persistent measles virus infection.
A teljes tartalom elolvasásához bejelentkezés szükséges! Bejelentkezés