ÖSSZEFOGLALÁS:
Az emlősök belső fülében a külső szőrsejt alapjául szolgál a cohleában történő aktív erősítési folyamatnak egyedülálló „elektromotilitási” tulajdonsága révén. Az elektromotilitás molekuláris alapját egy speciális fehérje (presztin) a felelős, mely elektromos inger hatására képes alakját, és ezáltal a sejt méretét megváltoztatni (Zheng és mtsai 2000). A KSZ efferens, kolinerg beidegzés alatt áll. Szőnyi és mtsai (1999) az Ach/cGMP/PKG kaszkád aktív részvételét hangsúlyozták más foszforilációs úttal szemben. Az efferens stimulus hatására létrejövő elmozdulás növekedésében a citoszkeleton aktív részvétele már bizonyított tény (He és mtsai 2003, Zhang és mtsai 2003). Ezzel ellentétben a motorfehérje szerepéről jelenleg semmilyen információ nem áll rendelkezésünkre. Kísérleteink során emberi vesesejt tenyészethez presztint kódoló DNS-t adtunk, így a vesesejtek presztin szintetizációjára váltak képessé. A motorfehérjét szintetizáló vesesejtek, a KSZ-hez hasonlóan szintén aktív mozgásra váltak képessé. Kísérletünk során a sejt mozgásakor a membránfelületen fellépő kapacitiv ellenállásnak a változását mértük. A külső szőrsejtre jellemző nem lineáris kapacitás (NLC) változás az elektromotilitás mérésének nemzetközileg elfogadott módszere (Ashmor; 1990). Vizsgálatunk során a másodlagos hírvivők (cGMP cAMP) és a protein kináz G gátló szerepét vizsgáltuk a presztin NLC funkció változásának a tükrében. Eredményeink bebizonyították, hogy a presztin molekula az elektromos inger hatására létrejövő elmozdulását a ciklikus guanozin monofoszfát szabályozni képes, melyben a protein kináz G enzim fontos szerepet játszik. Az efferens beidegzés által indukált elektromotilitás növekedésben, mind a citoszkeleton, mind a motorfehérje - immáron bizonyítottan - együttesen vesz részt.
SUMMARY
Outer hair cells (OHCs) in the mammalian organ of Corti express unique feature called “electromotility,” which is thought to provide the local active mechanical amplification of the cochlear response to sound. A widely accepted explanation for the cellular mechanism of electromotility is that unique motor protein - prestin - in the OHC basolateral membrane changes conformation when electric stimulation is applied, leading to a change in OHC length (Zheng et al, 2000). Efferent innervation of the OHC have been shown to have an effect on OHC electromotility. It has been suggested that increased amplitude of motility can be occur through the phosphorylation of some unspecified cytoskeltal proteins. The motor protein involvement in this process recently unknown. To address this question, we have established a heterologous system to study prestin function and its potential modification. In this system, prestin cDNA is transiently transfected into a human kidney cell line, TSA 201. The cells expressing prestin are selected to measure nonlinear capacitance (NLC), a signature of outer hair cell motility (Ashmore, 1990). Different chemicals, including a cGMR cAMP and PKG blocker have been applied to the transfected cells. Our data suggest that application of the cGMP analog can significantly increase nonlinear, voltage-dependent charge displacement in prestin transfected cells. Thereby prove that the efferent innervation of the OHC has an effect on both the cytoskeltal and the motor protein.
A teljes tartalom elolvasásához bejelentkezés szükséges! Bejelentkezés